Методика

1. Кондиционирование капилляра
Перед началом эксплуатации новый капилляр промыть 1 М раствором NaOH 3 минуты, дважды водой по 10 мин, буферным раствором 15 мин.
Между снятием каждой электрофореграммы кондиционировать капилляр следующим образом:
1 М NaOH - 2 мин при 950 мбар
Вода - дважды из разных емкостей по 3 мин при 950 мбар
Буферный раствор - дважды из разных емкостей по 3 мин при 950 мбар
Выдерживание в буферном растворе - 10 мин без давления

2. Проведение анализа
Введение образца: 10 сек при 50 мбар.
Детектор: 192 нм с шириной полосы 8 нм.
Напряжение: 20 кВ. Отрицательная полярность.
Температура капилляра: 30°С.
Время анализа: 20 мин.

Снимают электрофореграмму стандартного образца гепарина. Затем снимают электрофореграммы испытуемых образцов. Через каждые 5 измерений образцов повторяют снятие электрофореграммы стандарта.

3. Пригодность системы
Абсолютное время удерживания пика стандартного образца гепарина определяется физико-химическими свойствами каждого экземпляра используемого капилляра.

Воспроизводимость времени удерживания стандартного образца гепарина при 5 последовательно снятых на одном капилляре без дополнительных интервалов (кроме кондиционирования) электрофореграммах должна быть не хуже ± 0,1 мин.

Для заключения о наличии примесей время удерживания пиков на каждой электрофореграмме должно различаться не менее чем на 0,3 мин. При различии во времени удерживания пиков менее чем 0,3 мин для их идентификации используют добавление в пробу внутреннего стандарта гепарина; для этого растворы пробы и стандарта гепарина (каждый по 10 мг/мл), смешиваются в объемном отношении 1:1.